Plonojo sluoksnio chromatografija yra cheminės analizės metodas, pagrįstas sorbento sluoksnio, kurio storis 0,1-0,5 mm, naudojimu kaip stacionariąja faze. TLK metodas gali būti naudojamas įvairiose srityse ir leidžia nustatyti įvairiausius cheminius junginius.
Metodo principas
Plonasluoksnės chromatografijos metodas gimė iš popieriaus chromatografijos, o pirmieji eksperimentai buvo atlikti XIX amžiaus 80-aisiais. Aktyviai naudoti šią analizę pradėta tik po 1938 m.
TLC metodika apima judamą fazę (eliuentas), nejudančią fazę (sorbentas) ir analitę. Stacionari fazė uždedama ir tvirtinama ant specialios plokštės. Plokštė gali būti pagaminta iš stiklo, aliuminio arba plastiko - tai daugkartinio naudojimo substratai, kuriuos reikia kruopščiai nuplauti, išdžiovinti ir paruošti sorbento tepimui po kiekvieno naudojimo. Taip pat galima naudoti popierines plokštes, kurios po naudojimo išmetamos.
Silikagelis dažniausiai naudojamas kaip stacionari fazė, tačiau galima naudoti ir kitus sorbentus, pavyzdžiui, aliuminio oksidą. Naudojant tą ar tą sorbentą, reikia griežtai laikytis technologijos, kad rezultatas būtų tikslus, pavyzdžiui, nes silikagelis gali duoti neteisingą rezultatą, jei oras laboratorijoje yra per drėgnas.
Tirpikliai naudojami kaip judanti fazė, pavyzdžiui, vanduo, acto rūgštis, etanolis, acetonas, benzenas. Tirpiklį reikia rinktis atsakingai, nes chromatografijos rezultatas tiesiogiai priklauso nuo jo savybių (klampumo, tankio, grynumo). Kiekvienam tiriamam mėginiui parenkamas atskiras tirpiklis.
Analizė
Mėginys turi būti praskiestas tirpikliu. Jei nevisiškai ištirpsta ir lieka per daug priemaišų, mėginį galima išvalyti ekstrahuojant.
Mėginys plokštelę gali būti naudojamas automatiškai arba rankiniu būdu. Automatiniam naudojimui naudojamas mikropurškimo metodas, kai kiekvienas mėginys purškiamas ant atitinkamo substrato ploto. Rankiniam naudojimui naudojama mikropipetė. Kiekvienam mėginiui ant plokštelės dedami pieštuko ženklai. Kiekvienas mėginys kapiliarais padengiamas plokštele vienoje linijoje pakankamu atstumu nuo žymių, kad nereaguotų su švino anglimi.
Plokštė dedama į indą, kurio dugne pilamas eliuentas. Atrama dedama vienu kraštu į indą iki pažymėtos linijos. Indas yra sandariai uždarytas, kad būtų išvengta judančios fazės išgaravimo. Veikiant kapiliarinėms jėgoms, eliuentas pradeda kilti sorbento sluoksniu. Kai eliuentas pasiekia tam tikrą lygį, plokštelė išimama iš indo ir džiovinama.
Jei norima medžiaga neturi spalvos, jos nebus galima pamatyti ant pagrindo. Todėl atliekama vizualizacija - plokštelės apdorojimas jodo garais ar kitais dažais.
Po tokio apdorojimo rezultatas įvertinamas. Ant sorbento atsiranda įvairaus intensyvumo spalvotų sričių. Norint nustatyti medžiagą (ar medžiagų grupę), spalvoti plotai, jų dydis, intensyvumas ir judrumas lyginami su etaloniniu mėginiu.
TLC metodas yra plačiai naudojamas, nes jis yra greitas, pigus, tikslus, intuityvus, jam nereikia sudėtingos įrangos ir jį lengva interpretuoti.
